Entwicklung von Loop-mediated isothermal amplification (LAMP)-Assays zum schnellen Nachweis von Erregern bei lebensmittelbedingten Infektionen und Intoxikationen
Im Rahmen des Forschungsprojektes werden verschiedene LAMP-Assays zum Nachweis von Salmonella spp., Listeria monocytogenes, Bacillus cereus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli und Staphylococcus aureus entwickelt und validiert. Bei allen Spezies handelt es sich um lebensmittelassoziierte Zoonose-Erreger, die neben akuten, jedoch meist selbstlimitierenden gastroenteritischen Beschwerden zum Teil schwere Krankheitsverläufe oder Folgeerkrankungen auslösen können.
Mithilfe der LAMP-Methode werden die Erreger auf der Basis spezifischer DNA-Sequenzen identifiziert. Sechs Primer binden an eine ausgewählte Region innerhalb des Erreger-Genoms und führen zur Vervielfältigung der Sequenz unter konstanten Temperaturbedingungen. Durch die Verwendung eines interkalierenden Farbstoffes, der sich in die amplifizierte DNA einlagert, entsteht ein Fluoreszenzsignal, welches mithilfe optischer Geräte (z.B. Real-time Fluorometer Genie® II) gemessen werden kann. Die Leistung der Assays wird zunächst auf der Basis reiner DNA und schließlich in komplexen Matrizes aus unterschiedlichen Lebensmitteln überprüft. Sind die Verfahren geeignet, werden sie anhand natürlich kontaminierter Lebensmittelproben aus dem Einzelhandel validiert und stehen schließlich für die Analyse im Labor und weiterführende Untersuchungen im Rahmen zukünftiger Forschung zur Verfügung.
Publikationen
Kreitlow, A., Becker, A., Schotte, U., Malorny, B., Plötz, M., & Abdulmawjood, A. (2021). Establishment and validation of a loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay targeting the ttrRSBCA locus for rapid detection of Salmonella spp. in food. Food Control, 126, 107973.
DOI: https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2021.107973
Kreitlow, A., Becker, A., Schotte, U., Malorny, B., Plötz, M., & Abdulmawjood, A. (2021). Evaluation of different target genes for the detection of Salmonella sp. by loop‐mediated isothermal amplification. Letters in Applied Microbiology, 72(4), 420-426.
https://doi.org/10.1111/lam.13409
Kreitlow, A., Becker, A., Ahmed, M. F., Kittler, S., Schotte, U., Plötz, M., & Abdulmawjood, A. (2021). Combined Loop-Mediated Isothermal Amplification Assays for Rapid Detection and One-Step Differentiation of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in Meat Products. Frontiers in microbiology, 12.
DOI: https://doi.org/10.3389/fmicb.2021.668824
Busch, A., Becker, A., Schotte, U., Plötz, M., & Abdulmawjood, A. (2022). Mpl-Gene-Based Loop-Mediated Isothermal Amplification Assay for Specific and Rapid Detection of Listeria monocytogenes in Various Food Samples. Foodborne Pathogens and Disease.
