AG Brehm

Arbeitsgruppe Funktionelle Histologie und Zellbiologie: Prof. Dr. Ralph Brehm

Leitung

• Prof. Dr. Ralph Brehm

Mitarbeiter/innen

• Dr. med. vet. Karola Weider
• Jonathan Gerber, Master of Science
• Joanna Nölke, Tierärztin
• Marion Gähle, VMTA
• Nadine Schnepel, BTA
• Externe Doktorand/innen

Forschung

Der Forschungsschwerpunkt der Arbeitsgruppe Prof. Brehm (AG Funktionelle Histologie und Zellbiologie) liegt auf dem Gebiet der Reproduktionsmedizin. Aktuelle Forschungsprojekte beschäftigen sich vor allem mit der direkten Zell-Zell-Kommunikation über Connexine im Hoden verschiedener Spezies, der Rolle dieser Gap Junction-Proteine in der normalen Spermatogenese und mit der Relevanz von Connexin43 in der Pathogenese caniner und humaner Hodentumore. Genutzt werden sowohl funktionelle, transgene Tiermodelle als auch ein breites, zell- und molekularbiologisches Methodenspektrum.

Methodenspektrum

Transgene Tiermodelle:

• Sertoli Zell-spezifische Deletion von Cx43 (Cre/loxP-Rekombinasesystem mit AMH-Cre und Cx43-gefloxten Mäusen)
• Sertoli Zell-spezifische Deletion von Cx45 (Cre/loxP-Rekombinasesystem mit AMH-Cre und Cx45-gefloxten Mäusen)
• Keimzell-spezifische Deletion von Cx43 (Cre/loxP-Rekombinasesystem mit TNAP-Cre und Cx43-gefloxten Mäusen)

RNA/DNA-Ebene:

• PCR, RT-PCR, RT-PCR nach UV-Laser assistierter Mikrodissektion, Real time-PCR,
• In-situ-Hybridisierung, Northern Blot, Herstellung von DIG-markierten cRNA-Sonden (RNA-Extraktion, RT-PCR, S1-Klonierung, Plasmidextraktion, Restriktions-Endonuklease-Verdauung, In-vitro-Transkription)
• DNA-Genotypisierungen aus Schwanzspitzen (transgenes Mausmodell)

Protein-Ebene:

• Western Blot, Immunhistochemie, Immunfluoreszenz, Immunelektronenmikroskopie

Zellen- und Gewebelehre:

• Lichtmikroskopie und Elektronenmikroskopie (TEM, REM), Funktionelle TEM (Lanthan Tracer Studien)

Zellkultur:

Primäre Sertoli Zellkultur und Zelllinien, Klonierung (E. coli)